Secondo le statistiche dell'OMS, negli ultimi 40 anni, 25 milioni di persone sono morte di AIDS. Il danno di questa infezione è enorme. La maggior parte degli infetti si è rivelata in Africa, da dove proveniva questa infezione. Con l'HIV, la diagnosi della malattia diventa particolarmente rilevante. È vero, non ci sono ancora cure per l'HIV, ma un trattamento precoce può prolungare la vita del paziente e migliorarne la qualità.
Diagnosi dell'infezione da HIV
L'infezione da HIV è determinata in diversi stadi con i seguenti metodi:
- ELISA - test immunoenzimatico.
- Macchia occidentale.
- PCR - reazione a catena della polimerasi.
- Test rapidi.
Il metodo PCR è stato sviluppato dal biochimico americano Kary Mullis, che ha ricevuto il Premio Nobel per questo nel 1983. Oggi, questo metodo in medicina nella diagnosi di tutte le infezioni è considerato il principale per la sua accuratezza e contenuto informativo. L'HIV non fa eccezione a questo proposito.
L'essenza dell'analisi
Ogni cellula vivente contiene RNA e DNA. Questi acidi nucleici sono in grado di autocopiarsi e auto-replicarsi. Per ogni infezione, i frammenti di DNA sono unici. Anei fluidi biologici circolano questi frammenti di acidi nucleici. Vengono catturati e riconosciuti da un'attrezzatura speciale: il reattore. Questa è la base del metodo. L'assistente di laboratorio conta questi frammenti. Il retrovirus HIV è monitorato per l'RNA. Anche con copie singole di particelle virali, la PCR può rilevarle e contarle.
Il sangue venoso viene spesso utilizzato come fluido di prova. I componenti speciali del metodo si legano alle particelle del virus e le rendono rilevabili, poiché i frammenti trovati vengono moltiplicati.
Nel caso dell'HIV, il risultato della presenza del virus può essere ottenuto molto prima della comparsa della clinica. Pertanto, grazie alla sua elevata sensibilità, la PCR ha un valore diagnostico così elevato. Un enorme vantaggio della PCR è la versatilità del metodo. Il periodo di incubazione dell'infezione per la PCR non è un ostacolo.
Costo della ricerca
Il metodo PCR è piuttosto costoso. Questo è uno dei suoi grandi svantaggi. Richiede l'attrezzatura più moderna e un assistente di laboratorio altamente qualificato. Alla luce di quanto sopra, la diagnostica PCR non viene eseguita in piccoli insediamenti. Puoi fare il test solo in grandi cliniche specializzate.
Il costo del test del DNA dell'HIV nelle cliniche di Mosca parte da 2.800 rubli, la carica virale (RNA virale nel plasma) è determinata dalla PCR - da 8.800 rubli e la resistenza dell'HIV agli inibitori della proteasi - da 16.500 rubli. Come puoi vedere, i prezzi sono piuttosto alti. La PCR può essere eseguita gratuitamente nelle cliniche pubbliche secondo la politica MHI. Importante,che la procedura può essere svolta in forma anonima. Nel registro, il paziente riceve un numero con il quale può scoprire il risultato. Nei moderni centri medici ci sono account personali dei clienti in cui verranno inseriti questi dati.
Obiettivi di ricerca
La diagnostica PCR per l'HIV è prescritta in questi casi:
- Rilevamento dell'infezione in un bambino nato da una madre malata o da una portatrice per determinare l'infezione intrauterina.
- Se l'ELISA ha dato risultati discutibili (la PCR per l'HIV aiuta in questo caso a fare una diagnosi finale).
- Per rilevare il contenuto quantitativo del virus nel corpo.
- Con un immunoblot positivo, si completano a vicenda con la PCR.
- Test dei donatori.
- Per la diagnosi precoce dell'HIV.
- Per determinare l'efficacia e la resistenza all'ART.
Il vantaggio di questa analisi è che la PCR per l'HIV può essere eseguita anche per bambini di età inferiore a un anno.
La ricerca spesso non viene eseguita per la diagnosi primaria, ma già nel processo di trattamento. La diagnostica primaria sono studi sierologici (determinano il livello di anticorpi contro l'HIV). Se si ripete un risultato falso positivo, potrebbe trattarsi di una bassa carica virale.
La PCR diagnostica l'HIV quando non ci sono ancora anticorpi. Il metodo ELISA in questo caso non darà risposta.
E la PCR per l'HIV sarà già positiva. Ma i sintomi di questo periodo di HIV non sono specifici. Il paziente viene prima trattato per lungo tempo e senza successo per ARVI da un medico generico. Va tenuto presente che la diagnosi di HIV si basa solo suLa PCR non viene messa, è necessario superare altri test completi. Il metodo PCR è più spesso ausiliario per i casi difficili.
Preparazione per l'analisi
Prima di prendere la PCR per l'HIV, 2 giorni prima del test, non dovresti mangiare cibi grassi, alcol. È anche meglio non sforzarsi mentalmente e fisicamente. Se al paziente viene prescritto un ciclo di immunostimolazione, questo viene interrotto 2 settimane prima dell'analisi.
Il sangue va preso al mattino. Possono essere esaminati anche altri fluidi biologici del corpo (sperma, secrezione vaginale), ma il sangue è il materiale migliore. Non vengono utilizzati saliva, sudore, urina e lacrime, poiché il contenuto del virus in essi contenuto è minimo.
Plus della PCR per HIV
I vantaggi del metodo sono la bassissima probabilità di un risultato falso positivo, l'universalità della reazione per eventuali fluidi biologici del corpo. L'analisi ha una vasta gamma:
- Un prelievo di sangue può essere utilizzato per rilevare diverse infezioni.
- La tecnica è urgente, il risultato è pronto il giorno dopo.
- La fiducia è compresa tra 85 e 98%.
- La presenza di HIV può essere determinata 10-14 giorni dopo l'infezione (non ci sono ancora anticorpi in questo momento).
- Nessun limite di età, eseguibile immediatamente dalla nascita.
Contro del metodo
Gli svantaggi della PCR sono i seguenti:
- Costo dell'analisi.
- Richiede sofisticate apparecchiature mediche.
- Richiede assistente di laboratorio e medico altamente qualificato,analisi dell'acquirente.
- La reazione è molto sensibile, quindi l'errore potrebbe essere del 20%.
- Può risultare in un risultato falso positivo se il paziente ha processi autoimmuni, oncologia, infezioni croniche.
- È necessaria una pulizia speciale dei locali del laboratorio, perché il virus può entrare nell'analisi dall'aria. Allora il risultato sarà sbagliato.
Per i laboratori che effettuano la PCR, per migliorare la qualità della diagnostica, sono state sviluppate misure rigorose speciali secondo il sistema SanPiN per il controllo interno. Inoltre, devono essere osservate tutte le regole di lavoro con questa tecnica:
- Obbligatorio seguire rigorosamente le informazioni sulle provette.
- Prima del prelievo di sangue, controlla di nuovo e assicurati che l'analisi sia programmata.
- L'infermiera deve etichettare correttamente i tubi.
- L'assistente di laboratorio deve eseguire correttamente tutte le manipolazioni con il biomateriale al fine di prevenire la contaminazione incrociata.
- Il sistema di test deve essere di ottima qualità.
Solo se tutte queste condizioni sono soddisfatte, l'errore nella risposta può essere solo del 2% circa degli episodi.
Durata dell'analisi
Molti sono interessati a quanto tempo sarà pronta la PCR per l'HIV. La diagnosi dura non più di 8 ore. Il paziente potrebbe ricevere una risposta il giorno successivo. Il test rapido viene eseguito entro 2 ore.
Affidabilità PCR
Nonostante i suoi numerosi vantaggi, la PCR non è considerata un metodo diagnostico ideale. Viene contattato in casola necessità di ottenere test di screening per la presenza di HIV nell'organismo.
Quando viene prelevato il sangue per l'analisi?
Quanto tempo impiegare la PCR per l'HIV? Un risultato affidabile può essere ottenuto già durante il prelievo di sangue 4-4 giorni dopo la presunta infezione. Dopo 2 settimane, l'affidabilità per l'HIV sarà del 98% e con un periodo di 5 giorni - 80%. La presenza di un risultato negativo nella PCR per l'HIV sarà affidabile, ma per un risultato assolutamente accurato si esegue anche l'ELISA.
L'analisi ELISA sarà efficace solo se sono presenti anticorpi contro il virus, questa volta possono essere necessari da 1-3 mesi a sei mesi. Poiché l'ELISA dà una probabilità maggiore (98% -99,9%), la PCR non può essere definita un test di conferma del 100% per la presenza di infezione da HIV. Ma d' altra parte, questa è l'unica tecnica in cui non è necessario attendere la comparsa degli anticorpi.
Con l'HIV, la PCR può fornire informazioni sull'efficacia dell'ART, sullo stadio della malattia da HIV e sul numero di VN (una valutazione quantitativa della presenza di HIV nell'organismo). Questo parlerà della gravità e della portata del cambiamento.
Il test PCR per l'HIV è necessario anche se sono presenti anticorpi nel sangue, ma la loro presenza non indica clinicamente l'affidabilità dell'infezione da HIV.
Sono testati non solo per l'infezione e il sesso occasionale. Altre occasioni:
- Pianificazione della gravidanza.
- Prossima operazione.
- Sesso occasionale.
- Alcune professioni richiedono questo test per l'ammissione al lavoro (insegnanti, medici e altro personale medico).
- Prigionieri.
- pazienti con tubercolosi.
- Dipendenti del Ministero per le situazioni di emergenza e della polizia.
- Tornato dalle vacanze da paesi esotici (se vuoi assicurarti che non ci siano infezioni).
- Prostitute.
- Studenti stranieri.
- Droga.
Inoltre, alcuni sintomi in un paziente possono forzare un test HIV:
- Perdita di peso improvvisa.
- Diarrea che dura da più di 3 settimane
- Alta temperatura irragionevole per molto tempo.
- Linfonodi ingrossati.
- Causa inspiegabile di polmonite, candidosi, ecc.
Decifrare l'analisi è prerogativa del medico curante, non dell'assistente di laboratorio.
PCR o ELISA, che è meglio?
Quando la diagnosi PCR dell'RNA del virus HIV viene rilevata sia qualitativamente che quantitativamente. Questa analisi identifica chiaramente un patogeno specifico anche se sono presenti diversi agenti patogeni che reagiscono in modo incrociato. Il materiale biologico può essere utilizzato anche in forma essiccata. Lo svantaggio è l'elevata sensibilità della PCR, quando un risultato falso positivo può essere dato dalla presenza anche di una piccola quantità di DNA estraneo su strumenti o provette.
Il compito e la possibilità dell'ELISA è di determinare la presenza di anticorpi contro un retrovirus. Sebbene la sua precisione sia del 99%, non è applicabile nelle fasi iniziali.
Test HIV qualitativo
La PCR di alta qualità per l'HIV determina la presenza del virus nel corpo. I risultati in questo caso saranno così: positivo, falso positivo, negativo. Ma questo studio non fornirà informazioni sulla quantità di retrovirus. Tale analisi qualitativainappropriato quando l'infezione da HIV è già stata rilevata nel corpo con altri mezzi.
È impossibile controllare l'efficacia del trattamento con PCR di alta qualità.
Quantificazione HIV
Eseguito solo da persone con infezione da HIV per contare il numero di copie dell'RNA del virus in un prodotto biologico.
Lo scopo di tale studio è monitorare il trattamento in corso e identificare la resistenza del virus ad esso. La terapia antivirale in tali calcoli non è prescritta alla cieca da un medico, quindi sarà più efficace. La PCR quantitativa per l'infezione da HIV viene eseguita molto più spesso. Questa analisi viene visualizzata come una copia/ml di sangue.
Quali risultati possono essere forniti:
- L'RNA del virus è assente o molto piccolo (circa 20 copie/ml). Nessuna certezza di diagnosi.
- Da 20 - a 10 fino al 6° grado copie / ml - la diagnosi è affidabile.
- Più di 106 copie/ml - VN alto.
I laboratori possono eseguire test PCR in tempo reale per l'HIV. Ciò implica l'osservazione e la valutazione numerica dell'accumulo di prodotti della PCR con registrazione automatica dei risultati.
