Il metodo di diagnosi genetica preimpianto viene utilizzato per valutare lo stato di salute di un embrione ottenuto mediante fecondazione in vitro prima dell'impianto nella cavità uterina. Il metodo consente non solo di scegliere un futuro bambino sano, ma anche di aumentare le possibilità di gravidanza. La tecnica è ampiamente utilizzata in tutte le cliniche mondiali coinvolte nella fecondazione in vitro.
Concetti generali
La diagnosi genetica pre-impianto consente di condurre un esame completo ed escludere la presenza di anomalie cromosomiche in generale o qualsiasi deviazione specifica. Di recente, parallelamente ai difetti precoci, sono in corso lo screening dei geni che possono provocare l'insorgenza di tumori in età adulta (ovaie, intestino, seno).
Nel caso di un portatore di malattie genomiche da parte di madre, viene eseguita una biopsia di diversi corpi polari dell'ovulo anche prima della fecondazione. I metodi descritti sono un' alternativa alla diagnosi prenatale precoce, che consente di mettere in guardia contro l'aborto se il feto ha improvvisamente patologie genetiche.
La diagnosi genetica pre-impianto consente di determinare il sesso del futuro bambino già in fase di screening. Viene utilizzato per prevenire lo sviluppo di anomalie legate al genere.
Come vengono ereditate le malattie genetiche
Distinguere tra patologie ereditarie emerse in base al tipo dominante, recessivo e legato all'x.
| Tipo di eredità | Caratteristiche | Rischio di avere un bambino malato |
| Dominante | Uno dei partner ha un gene difettoso che è dominante nella loro coppia | 50% eredita il gene |
| Recessiva | Entrambi i partner portano lo stesso gene difettoso ma hanno una coppia normale | Il 50% diventa portatore, il 25% si ammala |
| Collegato all'X | Le donne sono protette dalla patologia dai loro cromosomi e sono esclusivamente portatrici. Gli uomini sono caratterizzati dallo sviluppo di un'anomalia | un uomo ha il 50% di possibilità di ereditare un gene e una malattia, una donna ha la possibilità di diventare portatrice come sua madre - 50% |
Chi viene proiettato?
La diagnosi genetica preimpianto (PGD) viene eseguita nei seguenti casi:
- La presenza di una o entrambe le coppie di malattie ereditarie o alterazioni del cariotipo. Spesso i partner stessiconoscono i loro problemi, meno spesso lo scoprono durante il processo di screening.
- Aborto spontaneo ricorrente. Il problema di questo non sono le anomalie da parte dei genitori (potrebbero non esserlo affatto), ma le mutazioni genetiche del feto che causano aborti spontanei.
- L'età delle persone che si sottopongono al programma di fecondazione in vitro ha più di 38 anni.
- Cronologia di più di 3 tentativi di fecondazione in vitro falliti.
- Infertilità maschile.
- Inclusione di ICSI (iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi) nel programma di fecondazione. Il processo è irto dello sviluppo di anomalie genetiche nell'embrione.
- Storia della talpa idatiforme.
Caratteristiche di PGD
La ricerca nel campo della diagnosi genetica preimpianto suggerisce che il metodo ha il diritto di esistere, aiuta a diagnosticare e prevenire le anomalie cromosomiche, tuttavia richiede un ulteriore miglioramento.
Le caratteristiche di PGD sono le seguenti:
- Il tasso di aborto spontaneo con screening è inferiore rispetto a senza screening;
- Al momento non ci sono prove che aumentino le possibilità di gravidanza;
- esiste la possibilità di un risultato falso: l'embrione è sano, ma il risultato mostra deviazioni, l'embrione è malato, ma lo studio dice diversamente (5-10% dei casi).
Diagnosi genetica preimpianto (esame blastomerico)
Dopo l'accordo per la fecondazione in vitro, lo specialista della riproduzione valuta la necessitàPGD per una coppia sposata. Se indicato, i partner possono concordare o rifiutare la procedura. Successivamente, viene firmato un documento che conferma l'autorizzazione a condurre il sondaggio.
Il terzo giorno dopo la fecondazione dell'embrione, il genetista prende una delle cellule blastomeriche formate per l'analisi. Si ritiene che ciò non abbia conseguenze per il feto, poiché tutte le cellule sono intercambiabili.
Lo specialista conduce ricerche in una delle aree precedentemente selezionate: studio della struttura della cellula con uno speciale microscopio a fluorescenza, test del DNA utilizzando il metodo della reazione a catena della polimerasi per determinare la presenza di una mutazione.
In base al risultato, gli embrioni con anomalie non verranno utilizzati nel processo di impianto. Selezionato sano e di alta qualità. Quindi uno o più di essi vengono trasferiti nell'utero della madre.
Quando si verifica una biopsia del corpo polare, viene esaminato il set cromosomico della madre. Viene effettuato nel caso in cui venga rilevata la presenza di una patologia geneticamente determinata lungo la linea femminile. La procedura consente di determinare se l'uovo è sano, che verrà utilizzato per la fecondazione, senza violarne la struttura. Se non vengono rilevate anomalie, può essere utilizzato per la fecondazione e il trasferimento nella cavità uterina.
Ci sono casi in cui vengono schermati i corpi polari e poi i blastomeri. Ciò consente di ottenere un risultato più affidabile. Lo schema in base al quale verrà effettuato l'esame è scelto dallo specialistagenetista.
Metodi utilizzati
Le anomalie numeriche e strutturali dei cromosomi sono determinate dal metodo dell'ibridazione fluorescente. Questo metodo consente di specificare la sequenza di DNA della cellula. Vengono utilizzate speciali sonde di DNA, che nella loro struttura sono siti complementari per le zone di DNA dei blastomeri.
La sonda contiene un nucleotide e un fluoroforo (una molecola capace di fluorescenza). Dopo l'interazione del DNA bersaglio con la sonda DNA, si formano aree illuminate che vengono visualizzate al microscopio a fluorescenza.
Utilizzare anche il metodo PCR (reazione a catena della polimerasi). Consiste nel copiare una sezione di DNA usando enzimi in determinate condizioni di laboratorio.
Diagnosi di aneuploidia
Questo è uno dei metodi di diagnosi genetica preimpianto, che permette di rilevare la presenza di anomalie cromosomiche numeriche (identificare cromosomi in eccesso o mancanti).
Il materiale genetico è costituito da 46 cromosomi, metà dei quali sono dati dal padre e l' altra metà dalla madre. Se l'embrione riceve un cromosoma in più, si chiama trisomia e la perdita di uno qualsiasi è chiamata monosomia. Questi difetti possono causare:
- mancanza di impianto di embrioni;
- aborto spontaneo;
- patologie ereditarie (sindrome di Down, sindrome di Klinefelter, sindrome di Shereshevsky-Turner).
Infertilità maschile ed età di coppiasono fattori frequenti nello sviluppo di tali anomalie.
PGD di patologie monogeniche
La diagnosi genetica preimpianto degli embrioni al fine di determinare la presenza di malattie monogeniche viene effettuata in famiglie dove è stata accertata la presenza di anomalie ereditarie. Se una coppia ha già un bambino con una malattia omogenea, l'opportunità di dare alla luce un altro bambino malato aumenta più volte.
La causa è una violazione della sequenza dei cromosomi in una certa sezione del DNA. Queste malattie includono:
- fibrosi cistica;
- sindrome adrenogenitale;
- fenilchetonuria;
- emofilia;
- anemia falciforme;
- Sindrome di Wernig-Hoffman.
Vantaggi e rischi del metodo
La diagnosi genetica pre-impianto, considerata ambigua, presenta alcuni vantaggi nel campo dello screening prenatale:
- solo embrioni sani e di alta qualità vengono trasferiti nell'utero;
- riduce il rischio di avere un bambino con anomalie genetiche;
- dimezzare il rischio di aborto spontaneo;
- dimezzare il rischio di gravidanze multiple;
- 10% in più di possibilità di impianto di embrioni;
- 20% di aumento delle possibilità di nascita di successo di un bambino.
Il rischio di danni involontari all'embrione durante la PGD è dell'1%. La probabilità di un risultato errato è 1:10, inoltre, una probabilità del 3% che un embrione con qualsiasi anomalia venga giudicato sano.
Probabilità che avrà un embrione sanodeviazioni - 1:10. 1:5 possibilità che il trasferimento degli embrioni nella cavità uterina venga annullato a causa delle anomalie riscontrate in ciascuno di essi.
Controindicazioni
La diagnosi genetica preimpianto (PGD), le cui conseguenze per l'embrione non sono state chiaramente identificate, ha una serie di controindicazioni da condurre:
- frammentazione dell'embrione superiore al 30% (la formazione di frammenti fino al 25% è considerata la norma);
- presenza di blastomeri multinucleati nell'embrione;
- l'embrione ha meno di 6 blastomeri il terzo giorno del suo sviluppo.
Sicurezza del metodo
La diagnosi viene eseguita in una fase iniziale della creazione di un organismo futuro, quando tutte le sue cellule sono pluripotenti, ovvero da ciascuna si può formare un organismo sano a tutti gli effetti.
Tutti i passaggi PGD in corso non causano tempo all'embrione, al feto e al nascituro. Dopo aver ricevuto il campione per la ricerca, viene preparato in modo speciale. Le cellule vengono poste su un vetrino, su cui sono fissate, o in una soluzione tampone.
Costo della procedura
La diagnosi genetica pre-impianto, il cui costo varia da 50 a 120 mila rubli, a prima vista, sembra una costosa manipolazione. Tuttavia, la salute e il trattamento di un bambino con patologie geneticamente determinate costeranno molto di più.
La procedura offre tutti i vantaggi rispetto alle donne che sono state in grado di concepire un bambino in modo naturalemodo, dal momento che un tale metodo diagnostico non è disponibile per loro. La diagnosi genetica preimpianto, il cui prezzo è trascurabile rispetto alla fecondazione in vitro stessa, serve solo come aggiunta al programma generale che consente non solo di sopportare e partorire, ma anche di crescere un bambino sano.
