Ricerca batteriologica: algoritmo, metodologia, obiettivi, fasi

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Ricerca batteriologica: algoritmo, metodologia, obiettivi, fasi
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Cos'è la ricerca batteriologica? Secondo quale schema si effettua? Cosa si intende per sicurezza in questo caso? Quali sono gli obiettivi e le fasi della ricerca batteriologica?

Informazioni generali

esame batteriologico
esame batteriologico

L'esame batteriologico è un processo scientifico in cui vengono identificati i batteri e ne vengono studiate le proprietà al fine di effettuare una diagnosi microbiologica. Di grande importanza qui è la determinazione del tipo o della specie del microrganismo risultante (è implicita la coltura pura). Questo è accompagnato dallo studio delle proprietà biochimiche e fisiologiche degli organismi, nonché dalla tendenza alla formazione di tossine. A tal fine vengono utilizzate reazioni di precipitazione e agglutinazione. Viene anche praticato per infettare animali da laboratorio con successiva individuazione di alterazioni patologiche.

Lavorare con materiale di prova

algoritmo di ricerca batteriologica
algoritmo di ricerca batteriologica

L'algoritmo di studio batteriologico prevede il rigoroso rispetto di istruzioni speciali. Pertanto, il materiale di prova deve essere raccolto in piastre sterili in condizioni asettiche. È anche necessario prendersi cura diper garantire la consegna al laboratorio il prima possibile. È auspicabile la conservazione a freddo dei campioni. La tecnica della ricerca batteriologica prevede molte situazioni possibili. Pertanto, il tipo di oggetto, le proprietà del microrganismo e la natura della malattia spesso rendono necessario lo sviluppo di istruzioni individuali per il lavoro. Un gran numero di metodi diversi sono utilizzati nel lavoro. Uno dei più comuni è la batterioscopia. Ma se i batteri non vengono riparati, viene utilizzata una goccia schiacciata o appesa. Va notato che le ultime due opzioni sono caratterizzate da un aumento del livello di contagiosità.

Batterioscopia

In questo caso, vengono utilizzati i tratti. Per crearli è necessario distribuire una goccia del liquido che si sta studiando sulla superficie di un vetrino. Zates dovrebbe asciugarlo. Questo viene spesso fatto muovendo il farmaco attraverso una fiamma ottenuta da un bruciatore a gas. Sebbene i composti di fissaggio possano essere utilizzati in alternativa. Per indicare che le azioni preparatorie sono state eseguite con questa preparazione, è macchiata. Lo scopo di tale manipolazione è l'accuratezza, che è molto importante quando si esegue l'esame microscopico e batteriologico. Dopotutto, se riutilizzi il farmaco per un altro scopo, otterrai del porridge, con cui sarà molto difficile lavorare in modo efficace.

Perché la batterioscopia è così popolare

fasi della ricerca batteriologica
fasi della ricerca batteriologica

Non da ultimo per la disponibilità di questo metodo. Se viene effettuato uno studio batteriologico di una nuova preparazione, per determinare l'agente patogenopossono essere utilizzate reazioni microchimiche o colorazione selettiva di varie parti strutturali del microrganismo. Qual è il migliore? Un risultato più accurato può essere ottenuto quando si lavora con una preparazione colorata. In questo caso, il materiale di prova viene applicato su un vetrino pre-preparato. E assicurati di assottigliare (e se possibile anche) lo strato. Dopodiché, devi aspettare che il farmaco si asciughi nell'aria. I microrganismi vengono quindi fissati utilizzando uno dei metodi convenzionali. Successivamente, la preparazione raffreddata viene sottoposta a colorazione con una vernice differenziale o semplice. Per questo possono essere utilizzati preparati secchi e nativi. Dopodiché, resta da dirigere i raggi ultravioletti o corti blu verso il luogo di accumulo degli organismi, che fa brillare l'intero microbo o alcune parti del suo corpo.

Applicazione pratica della batterioscopia

È usato per diagnosticare una serie di malattie infettive. Le più famose sono la tubercolosi, la gonorrea e la febbre ricorrente. Inoltre, ricorrono alla ricerca per studiare l'intero complesso della microflora di un organo o prodotto. Ma i critici spesso sottolineano la relativa inaffidabilità e imprecisione di questo metodo.

Colture e subcolture di colture batteriche

obiettivi della ricerca batteriologica
obiettivi della ricerca batteriologica

Eseguire con una pipetta Pasteur. L'esecuzione dell'esame batteriologico e citologico è spesso difficile da eseguire senza l'inoculazione e la subcoltura durante il flusso di lavoro. Quando si lavora con una pipetta Pasteur, la sua puntarompere con le pinzette. Lo strumento stesso viene quindi portato attraverso la fiamma del bruciatore e quindi lasciato raffreddare. A proposito, per la semina possono essere utilizzati sia mezzi nutritivi liquidi che solidi. La scelta è influenzata dagli obiettivi della ricerca batteriologica perseguiti. Allo stesso tempo, è necessario aderire all'algoritmo del lavoro e delle precauzioni di sicurezza. Quindi, quando si lavora con un mezzo nutritivo liquido, è necessario assicurarsi che non fuoriesca e non bagni i bordi del tappo e le provette. Quando lo studio viene eseguito con materiale solido, viene spesso utilizzato un ago speciale per entrare nella coltura. Quando si esegue la semina e la risemina, devono essere eseguite vicino alla fiamma di un bruciatore a gas. Per la purezza dell'esperimento, la provetta non deve rimanere aperta per molto tempo. Per quanto riguarda lo strumento con cultura: dovresti assicurarti che non tocchi nulla. Inoltre, la tecnica della ricerca batteriologica prevede di bruciare i bordi della provetta prima di chiuderla. Un prodotto finito dovrebbe essere firmato subito dopo la produzione per evitare confusione futura.

Efficienza di semina

tecnica di esame batteriologico
tecnica di esame batteriologico

Si ritiene che questo metodo consenta di ottenere dati più accurati e affidabili durante la diagnosi batteriologica rispetto alla batterioscopia precedentemente considerata. In questo caso, l'algoritmo delle azioni è il seguente:

  1. Inizialmente, una coltura pura viene spalmata sulla superficie del mezzo nutritivo, che viene versato in una capsula di Petri.
  2. La semina iniziale dovrebbe essere effettuata in condizioni favorevoli per la speciemicrorganismi.
  3. Dopo un giorno o due, in presenza di un ambiente ottimale, tutte le colonie adatte si spostano dove possono svilupparsi al massimo. Questo li libera, quindi, dalla microflora estranea.

Il risultato finale è una coltura di batteri omogenei che possono essere identificati.

Culture pure

Ma come sono fatti? Per questo vengono utilizzati metodi biologici e meccanici. Nel primo caso, un ruolo importante è svolto dai mezzi nutritivi, dove ci sono condizioni necessarie favorevoli allo sviluppo di una particolare cultura. Un approccio può essere utilizzato anche quando gli animali da laboratorio sensibili a un particolare tipo di batteri vengono infettati. I metodi meccanici si basano sull'uso di uno strumento sterile, con il quale la coltura viene posta in un mezzo nutritivo situato nella prima, seconda e terza capsula Petri. Quindi è necessario attendere che le singole colonie crescano e una cultura pura ris alterà già da esse. I batteri possono anche essere coltivati in appositi termostati, dove la temperatura viene mantenuta ad un certo livello (di solito circa 37 gradi). In questo caso, il processo continua per circa un giorno. Ma, a seconda del tipo di microrganismi, possono essere stabiliti altri termini. Altrettanto importante è la presenza della concentrazione richiesta di ossigeno. Per fare ciò, utilizzare vari metodi di aerazione. Finora abbiamo parlato della situazione nel suo insieme e in generale, ma ora concentriamo la nostra attenzione su quale sia lo schema della ricerca batteriologica.

Pratica

schemaricerca batteriologica
schemaricerca batteriologica

Una serie di metodi viene spesso utilizzata per rilevare i microrganismi patogeni nel corpo di un paziente o di un potenziale portatore. I materiali ei metodi utilizzati dipendono dagli obiettivi dell'analisi, nonché dalle condizioni dell'ambiente in cui viene svolto il lavoro. In pratica, il più delle volte i batteri vengono rilevati attraverso emocolture prelevate da una persona o da un animale. Se le lesioni locali sono ben definite, i patogeni possono essere ricercati nelle aree problematiche. Questo è tipico per disturbi come dissenteria, gonorrea, difterite e un certo numero di simili. In casi particolarmente gravi, questo processo è suddiviso in fasi separate dell'esame batteriologico (che è tipico della febbre tifoide). Ognuno di loro utilizza i propri metodi, volti a trovare la causa dell'infezione. Diamo un'occhiata più da vicino alla situazione con la febbre tifoide. Nella prima settimana di malattia, il modo più affidabile per diagnosticare la malattia sono le emocolture. Sul secondo, uno studio sierologico è considerato tale. Nella terza settimana vengono esaminate le feci. L'ultimo metodo è considerato il controllo dei convalescenti.

Identificazione dei microrganismi

Inizia con il processo di tintura. Quindi esaminano come il batterio può scomporre carboidrati, aminoacidi e così via. Inoltre, questo processo può essere integrato dallo studio di altre proprietà che ogni singolo genere o specie di microrganismi possiede. Ad esempio, dovrebbero essere fornite le possibilità di dissolvere gli eritrociti di vari animali, l'effetto sulla coagulazione del plasma sanguigno e sulla dissoluzione del coagulo.fibrina e così via. Tutto questo sono le caratteristiche differenziali dei singoli rappresentanti del micromondo. Inoltre, l'identificazione sierologica può essere utilizzata per il riconoscimento finale (ma si tratta di solito di batteri patogeni che appartengono alla famiglia intestinale).

Conclusione

esame microscopico e batteriologico
esame microscopico e batteriologico

Va notato che un certo numero di microrganismi non può essere identificato con i metodi descritti nell'articolo. In questo caso, la pratica di infettare gli animali da laboratorio è ampiamente utilizzata. Il calcolo viene effettuato sul fatto che apparirà la caratteristica tossigenicità o patogenicità, che non si osserva in condizioni artificiali. L'infezione può anche essere utilizzata come metodo per l'accumulo di microbi patogeni. E già quando vengono confrontate le caratteristiche della cultura studiata, che si trovano nel processo di studio delle proprietà biologiche, morfologiche, sierologiche e biochimiche, possiamo dire che è noto con che tipo di microbi abbiamo a che fare. Per identificazione si intende un'indicazione del genere, della specie e del tipo di batterio. Se il microrganismo oggetto di studio si discosta in determinate proprietà dalla sua caratteristica tipica, è necessario indicarlo. Un certo numero di esperti ritiene che in tali casi sarà utile re-identificare con la duplicazione di tutti i metodi e le tecniche utilizzate. A volte la ricerca può essere portata al livello successivo, il che richiede un approccio più serio (e più costoso). Se sono stati ottenuti risultati negativi, ciò indica che la preparazionei microrganismi erano assenti o non erano vitali. Ma per l'accuratezza della ricerca, se si sospetta un certo numero di portatori di bacilli (dissenteria, difterite, febbre tifoide), in questi casi vengono mostrati controlli ripetuti. Ciò è necessario affinché gli specialisti abbiano un'idea precisa di cosa devono affrontare.

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